PCR, ή αλλιώς αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, είναι μια μέθοδος για εργαστηριακή διάγνωση διαφόρων μολυσματικών ασθενειών.
Αυτή η μέθοδος αναπτύχθηκε από τον Cary Muillis το 1983. Αρχικά, η PCR χρησιμοποιήθηκε μόνο για επιστημονικούς σκοπούς, αλλά μετά από λίγο εισήχθη στον τομέα της πρακτικής ιατρικής.
Η ουσία της μεθόδου είναι ο προσδιορισμός του αιτιολογικού παράγοντα μόλυνσης σε θραύσματα DNA και RNA. Για κάθε παθογόνο υπάρχει ένα θραύσμα αναφοράς DNA που ενεργοποιεί τη δημιουργία ενός μεγάλου αριθμού αντιγράφων του. Συγκρίνεται με την υπάρχουσα βάση δεδομένων που περιέχει πληροφορίες σχετικά με τη δομή του DNA διαφόρων τύπων μικροοργανισμών.
Με τη βοήθεια αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης, είναι δυνατόν όχι μόνο να ανιχνευθεί η μόλυνση αλλά και να δοθεί μια ποσοτική αξιολόγηση.
Πότε χρησιμοποιείται PCR;
Η ανάλυση του βιολογικού υλικού, που πραγματοποιείται με τη βοήθεια PCR, βοηθά στην ανίχνευση διαφόρων ουρογεννητικών λοιμώξεων, συμπεριλαμβανομένων των κρυμμένων, οι οποίες δεν εμφανίζονται ως ειδικά συμπτώματα.
Αυτή η μέθοδος έρευνας μας επιτρέπει να εντοπίσουμε τις ακόλουθες λοιμώξεις στους ανθρώπους:
- ιός απλού έρπητα και των δύο τύπων.
- HIV λοίμωξη;
- gardnerellez ;
- χλαμύδια.
- ureaplasmosis;
- Candidiasis;
- μυκοπλάσμωση;
- τριχομονάση;
- μόλυνση από ιό θηλώματος .
- καθώς και ηπατίτιδα Β και C, φυματίωση, ελικοβακτηρίωση, μολυσματική μονοπυρήνωση.
Κατά την προετοιμασία για και κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, σε μια γυναίκα πρέπει να εκχωρηθεί διάγνωση PCR για διάφορες σεξουαλικές λοιμώξεις.
Βιολογικό υλικό για έρευνα PCR
Για την ανίχνευση μολύνσεων με PCR, μπορούν να χρησιμοποιηθούν τα ακόλουθα:
- ούρα, ένα στέλεχος από τον αυχενικό σωλήνα (στις γυναίκες), ένα στικ από την ουρήθρα, εκκρίσεις από τα γεννητικά όργανα - για δοκιμές για σεξουαλικές λοιμώξεις.
- αίμα - για έρευνα σχετικά με τη μόλυνση από τον ιό HIV και την ηπατίτιδα C.
- Ένα επίχρισμα από το λαιμό - για τη διερεύνηση μολυσματικής μονοπυρήνωσης.
Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της διάγνωσης των λοιμώξεων από την PCR
Τα πλεονεκτήματα της ανάλυσης για τη μόλυνση που διεξάγεται με τη μέθοδο PCR περιλαμβάνουν:
- Ομοιογένεια - όταν άλλες διαγνωστικές μέθοδοι είναι ανίσχυρες, η PCR ανιχνεύει οποιοδήποτε RNA και DNA.
- Ειδικότητα. Στο υλικό μελέτης, αυτή η μέθοδος αποκαλύπτει μια αλληλουχία νουκλεοτιδίων τυπική για ένα συγκεκριμένο παθογόνο μόλυνσης. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης καθιστά δυνατή την ταυτοποίηση διαφόρων παθογόνων στο ίδιο υλικό.
- Ευαισθησία. Εμφανίζεται μόλυνση κατά τη χρήση αυτής της μεθόδου, ακόμη και αν το περιεχόμενό της είναι πολύ χαμηλό.
- Αποτελεσματικότητα. Ο εντοπισμός του αιτιολογικού παράγοντα της λοίμωξης απαιτεί αρκετό χρόνο - λίγες μόνο ώρες.
- Επιπλέον, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης βοηθά στην ανίχνευση όχι της αντίδρασης του ανθρώπινου σώματος στη διείσδυση παθογόνων μικροοργανισμών, αλλά σε ένα ειδικό παθογόνο. Λόγω αυτού, είναι δυνατό να εντοπιστεί η ασθένεια του ασθενούς προτού αρχίσει να εκδηλώνεται με συγκεκριμένα συμπτώματα.
Τα «μειονεκτήματα» αυτής της διαγνωστικής μεθόδου περιλαμβάνουν την ανάγκη για αυστηρή τήρηση των απαιτήσεων για τον εξοπλισμό εργαστηριακών χώρων με φίλτρα υψηλής καθαρότητας,
Μερικές φορές μια ανάλυση που πραγματοποιείται με PCR μπορεί να δώσει αρνητικό αποτέλεσμα παρουσία εμφανών συμπτωμάτων μιας συγκεκριμένης ασθένειας. Αυτό μπορεί να υποδηλώνει μη συμμόρφωση με τους κανόνες συλλογής βιολογικού υλικού.
Ταυτόχρονα, ένα θετικό αποτέλεσμα της ανάλυσης δεν είναι πάντα μια ένδειξη ότι ο ασθενής έχει μια συγκεκριμένη νόσο. Έτσι, για παράδειγμα, μετά από τη θεραπεία, ο νεκρός παράγοντας για ορισμένο χρόνο δίνει ένα θετικό αποτέλεσμα της ανάλυσης PCR.